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賽多培?培養(yǎng)基系列再添新成員——增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基和噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)
發(fā)布時間:2024/7/24 9:37:43   點擊次數(shù):475次

 

        賽爾瑞成在培養(yǎng)基領(lǐng)域持續(xù)深耕,研究領(lǐng)域涵蓋細(xì)菌及細(xì)胞治療用相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)基及配套試劑的開發(fā),陸續(xù)推出了大腸桿菌高密度表達(dá)培養(yǎng)基、人γδT細(xì)胞擴增試劑盒、人T細(xì)胞擴增試劑盒、大腸桿菌專用破菌液、超級核酸酶等以“賽多培”為品牌的系列產(chǎn)品,在科研和工業(yè)領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。近期,基于客戶的需求和賽爾瑞成技術(shù)團(tuán)隊在大腸桿菌發(fā)酵領(lǐng)域的經(jīng)驗,公司技術(shù)團(tuán)隊在張眾博士的帶領(lǐng)下,開發(fā)出了賽多培®增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基”和“賽多培®噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)兩款產(chǎn)品。

 

一、賽多培®增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基


        傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl,其中酵母提取物為微生物提供碳源和能源,磷酸鹽、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供無機鹽。賽多培®增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基是賽爾瑞成在傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良而來,能夠較傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基大大提高菌體密度,提高目的蛋白表達(dá)量數(shù)倍。

 

        使用賽多培®增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基進(jìn)行大腸桿菌培養(yǎng)時,流程與傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基使用方法一致,與“賽多培®大腸桿菌高密度表達(dá)培養(yǎng)基”有所區(qū)別的是,賽多培®增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基仍需添加IPTG進(jìn)行目標(biāo)蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)。


應(yīng)用案例


1. 大腸桿菌DH5α培養(yǎng)對比結(jié)果
        以1: 1000比例轉(zhuǎn)種過夜活化菌至新鮮培養(yǎng)基,37°C,180rpm培養(yǎng):

 
2. 大腸桿菌BL21(DE3)培養(yǎng)對比結(jié)果
        以含有質(zhì)粒pET21a-O的BL21(DE3)為測試菌種(該菌種表達(dá)蛋白O)。以1: 1000比例轉(zhuǎn)種過夜活化菌至新鮮培養(yǎng)基(含相應(yīng)抗生素),37°C,180rpm培養(yǎng):


 3. 大腸桿菌BL21(DE3)/pET21a-O誘導(dǎo)表達(dá)培養(yǎng)對比結(jié)果
        以含有質(zhì)粒pET21a-O的BL21(DE3)為測試菌種(該菌種表達(dá)蛋白O)。以1: 1000比例轉(zhuǎn)種過夜活化菌至新鮮培養(yǎng)基(含相應(yīng)抗生素),37°C,180rpm培養(yǎng),至OD600=1時,加入IPTG(終濃度1mM)誘導(dǎo)表達(dá)外源蛋白,繼續(xù)37°C培養(yǎng):


 

結(jié)論:在本次培養(yǎng)基和誘導(dǎo)表達(dá)條件下,O蛋白在賽多培®增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基中的表達(dá)總量明顯高于傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基。

 

產(chǎn)品目錄

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

目錄價格

限時優(yōu)惠

賽多培®增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基

PR0301

500 mL

85

買二送一

PR0302

10 L

640

買二送一

PR0303

10×10 L

2760

買二送一

注:限時優(yōu)惠截止到2024年8元31日

 

二、賽多培®噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)


        賽爾瑞成新推出的“賽多培®噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)”是一種在噬菌體污染環(huán)境中仍能夠進(jìn)行微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基添加劑,有效預(yù)防微生物發(fā)酵時噬菌體污染帶來的損失。噬菌體是一類侵害細(xì)菌(包括放線菌)的病毒,又稱細(xì)菌病毒,由于它的個體比細(xì)菌小數(shù)百倍,可以附著于塵埃上隨風(fēng)飄移,因此能長久地擴散和傳播到一定的范圍,并能脫離寄主而存活。它在寄主細(xì)胞內(nèi)能大量迅速繁殖子代噬菌體,如在十幾分鐘至一個小時左右,一個細(xì)胞感染一個噬菌體后可以釋放出數(shù)十個至數(shù)百個子代噬菌體。一旦發(fā)生噬菌體污染,會導(dǎo)致發(fā)酵異常、倒罐,使科研和工業(yè)生產(chǎn)遭到嚴(yán)重?fù)p失。在發(fā)酵工業(yè)中,發(fā)現(xiàn)發(fā)酵菌浸染噬菌體后,就要從菌種,培養(yǎng)基,環(huán)境,發(fā)酵系統(tǒng)管路,地溝,污水池,排風(fēng)口等進(jìn)行全面的消毒排查,消毒流程十分繁瑣。一般情況下,實驗室或生產(chǎn)線需要暫停發(fā)酵兩周到一個月的時間,嚴(yán)重影響實驗和生產(chǎn)進(jìn)度。

 

        經(jīng)多次嚴(yán)格試驗測試,賽爾瑞成 “賽多培®噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)”對溫和噬菌體和烈性噬菌體均具備出色的抑制作用,能夠?qū)崿F(xiàn)菌體的正常生長和蛋白表達(dá),搭配賽多培®增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基或大腸桿菌保密度表達(dá)培養(yǎng)基使用,效果更佳。

 

應(yīng)用案例


1. 賽多培®噬菌體抑制劑對溫和噬菌體的抑制作用


 
A:P蛋白表達(dá)菌培養(yǎng)24小時;  B:P蛋白表達(dá)菌+λ噬菌體共培養(yǎng)24小時;
C:P蛋白表達(dá)菌+λ噬菌體+噬菌體抑制劑共培養(yǎng)24小時

 

序號

A

B

C

OD600

3.3

0.96

2.9

 

2. 賽多培®噬菌體抑制劑對烈性噬菌體的抑制作用


 
A:Q蛋白表達(dá)菌培養(yǎng)24小時;   B:Q蛋白表達(dá)菌+T4噬菌體共培養(yǎng)24小時;
C:Q蛋白表達(dá)菌+T4噬菌體+噬菌體抑制劑共培養(yǎng)24小時

 

序號

A

B

C

OD600

4.05

1.2

3.67


3. 賽多培®噬菌體抑制劑與增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基聯(lián)合使用效果

 
R蛋白表達(dá)菌培養(yǎng)24小時效果對比

 

結(jié)論:賽多培®噬菌體抑制劑搭配增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基使用,效果更佳。


使用方法


        通常情況下,每升培養(yǎng)基添加 2mL本液體即可顯著發(fā)揮抗噬菌體效果,保障菌體正常生長。

 

產(chǎn)品目錄

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

目錄價格

限時優(yōu)惠

賽多培®噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)

PR0401

50 mL

450

買二送一

PR0402

200 mL

960

買二送一

注:限時優(yōu)惠截止到2024年8元31日

 

賽爾瑞成(北京)生命科學(xué)技術(shù)有限公司專業(yè)提供重組蛋白定制服務(wù)和細(xì)胞生物學(xué)試劑系列產(chǎn)品。

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