酵母表達(dá)系統(tǒng)是應(yīng)用較廣泛的真核表達(dá)系統(tǒng)，兼有原核和高等真核系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)，具有培養(yǎng)條件普通、生長(zhǎng)繁殖較快、易操作等優(yōu)點(diǎn)，具有一定的翻譯后加工能力，收獲的外源蛋白質(zhì)具有一定程度上的折疊加工和糖基化修飾，性質(zhì)更加穩(wěn)定，既可胞內(nèi)表達(dá)又可分泌表達(dá)，是較為理想的重組真核蛋白表達(dá)系統(tǒng)。常用的酵母表達(dá)系統(tǒng)主要有畢赤酵母和釀酒酵母兩種。
畢赤酵母體系優(yōu)勢(shì)在于有特有的強(qiáng)誘導(dǎo)性啟動(dòng)子，表達(dá)水平高，發(fā)酵工藝成熟，有適合真核生物基因產(chǎn)物正確折疊的細(xì)胞內(nèi)環(huán)境和糖鏈加工系統(tǒng)，蛋白轉(zhuǎn)錄后糖基化所增加的寡糖鏈長(zhǎng)度非常接近高等真核生物的結(jié)構(gòu)，活性幾率大大提高。釀酒酵母是GRAS生物，不產(chǎn)生毒素，已被美國(guó)FDA確認(rèn)為安全性生物，釀酒酵母表達(dá)重組蛋白有時(shí)發(fā)生超糖基化，分泌效率相對(duì)較低，適用于有特殊要求的重組蛋白表達(dá)。公司技術(shù)團(tuán)隊(duì)具有豐富的酵母蛋白表達(dá)體系的宿主細(xì)胞資源和載體選擇經(jīng)驗(yàn)。
酵母表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)
多年酵母體系蛋白表達(dá)經(jīng)驗(yàn)
十余種自主復(fù)制型和整合型載體
18種酵母專用啟動(dòng)子、6種酵母專用分泌信號(hào)肽可用于表達(dá)優(yōu)化
畢赤酵母和釀酒酵母共十余種宿主菌可供選擇
多種蛋白純化技術(shù)
從基因設(shè)計(jì)到蛋白制備全流程服務(wù)
技術(shù)服務(wù)流程
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詳細(xì)信息 |
服務(wù)周期 |
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基因設(shè)計(jì)及合成 |
為客戶提供密碼子、GC含量和特殊基因序列的優(yōu)化等基因設(shè)計(jì)工作，合成目的基因 |
2-3 周 |
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構(gòu)建表達(dá)質(zhì)粒 |
將目的基因連接至表達(dá)載體，構(gòu)建表達(dá)質(zhì)粒 |
1-2 周 |
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表達(dá)菌株建立 |
轉(zhuǎn)化及菌株鑒定 |
1-2 周 |
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初步表達(dá)測(cè)試及鑒定 |
評(píng)測(cè)初始表達(dá)水平并進(jìn)行初步表達(dá)優(yōu)化 |
1-2 周 |
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表達(dá)體系優(yōu)化 |
根據(jù)需要，針對(duì)測(cè)試結(jié)果和表達(dá)目標(biāo)，對(duì)表達(dá)體系的組合進(jìn)行系統(tǒng)性優(yōu)化 |
3-4 周 |
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放大培養(yǎng) |
根據(jù)需要進(jìn)行不同規(guī)模的放大培養(yǎng)發(fā)酵 |
1-2 周 |
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蛋白純化 |
采用多種純化方法對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行純化 |
1-2 周 |
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蛋白鑒定 |
對(duì)蛋白進(jìn)行SDS-PAGE、BCA蛋白濃度檢測(cè)等方法檢測(cè) |
0.5 周 |
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送貨 |
提供項(xiàng)目COA、純化蛋白 |
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