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Fibronectin簡(jiǎn)介

重組人纖維連接蛋白片段（Recombinant human fibronectin fragment，以下簡(jiǎn)稱Fibronectin（CH-296））為一段人工重組蛋白，由574個(gè)氨基酸組成，分子量約為63kDa。
 

Fibronectin（CH-296）包括三個(gè)功能區(qū) ：

[1] C-Domain：細(xì)胞粘附區(qū)域，含RGD序列，又稱細(xì)胞結(jié)合域（central cell-binding domain）
[2] H-Domain：提供病毒粘附，又稱肝磷脂結(jié)合域（heparin-binding domain）
[3] CS-1位點(diǎn)：提供細(xì)胞粘附功能

Fibronectin（CH-296）結(jié)構(gòu)如下圖所示
 

Fibronectin應(yīng)用

1. 提高逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒的轉(zhuǎn)染效率

作用原理如下：
細(xì)胞表面VLA-4及VLA-5可分別與Fibronectin（CH-296）上的CS-1 位點(diǎn)及C-Domain結(jié)合，逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以與H -Domain結(jié)合。在經(jīng)Fibronectin（CH-296）包被的培養(yǎng)容器表面，細(xì)胞與病毒載體以高濃度共存，從而顯著提高病毒的轉(zhuǎn)染效率30～70%。

 

2. 促進(jìn)細(xì)胞黏連粘附及刺激細(xì)胞增殖
細(xì)胞的黏連是機(jī)體結(jié)構(gòu)得以維持、細(xì)胞生長(zhǎng)完成的必要條件，研究結(jié)果表明：Fibronectin（CH-296）作為細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì)，可以促進(jìn)細(xì)胞的黏連生長(zhǎng)，使多種細(xì)胞的貼壁率達(dá)到90%以上（對(duì)照組為10%），細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)良好，細(xì)胞的代謝率增強(qiáng)，DNA、RNA及蛋白質(zhì)合成速度提高約5倍，細(xì)胞的集落率升高幾倍，原代培養(yǎng)的成活率明顯提高，細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)間縮短。

同時(shí)，F(xiàn)ibronectin（CH-296）能刺激細(xì)胞上千倍的增殖。作用原理是： Fibronectin（CH-296）和抗CD3抗體可分別與T淋巴細(xì)胞上的VLA和TCR結(jié)合， 兩者共同作用激活酪氨酸激酶pp125FAK，通過Ras途徑刺激T細(xì)胞的增殖和分化，使其獲得上千倍的增殖。
 

3. 其它應(yīng)用
研究還證明，F(xiàn)ibronectin能提高細(xì)胞的融合率，縮短融合周期，可應(yīng)用于許多科研中，如應(yīng)用于細(xì)胞雜交瘤技術(shù)等。將Fibronectin涂到微球載體上作為細(xì)胞大量生產(chǎn)的介質(zhì)，可以節(jié)省空間，節(jié)省原材料，成為應(yīng)用培養(yǎng)細(xì)胞技術(shù)來生產(chǎn)新藥品的基礎(chǔ)物質(zhì)。
 

賽爾瑞成提供高品質(zhì)重組人Fibronectin（CH-296），是在符合GMP標(biāo)準(zhǔn)要求的潔凈間由原核系統(tǒng)表達(dá)、經(jīng)分離純化和過濾除菌等步驟制成 ，分子量約為63.0 kDa。該產(chǎn)品具有高純度，高活性，低內(nèi)毒素的特點(diǎn) ，并通過 ISO9001、ISO13485質(zhì)量體系雙重認(rèn)證。
 

重組人Fibronectin（CH-296）產(chǎn)品特點(diǎn)
1、純化自重組  E.coli 菌株，其中攜帶有編碼人纖維連接蛋白片段的質(zhì)粒 
2、無血清無動(dòng)物來源
3、內(nèi)毒素水平：<1 EU/μg
4、純度：經(jīng)SDS-PAGE電泳檢測(cè)純度>95% 

生物學(xué)活性： 在促進(jìn)小鼠3T3細(xì)胞的粘附和增殖實(shí)驗(yàn)中，我公司生產(chǎn)的重組人Fibronectin（CH-296）表現(xiàn)出較好的促增值活性，結(jié)果如下圖所示：