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一、 新冠相關(guān)蛋白         

 

從2019年底到現(xiàn)在，我們?nèi)粘Ｉ钊匀簧钍苄鹿诜窝椎挠绊?，主要是因為新冠病毒不是永遠一成不變的，而是會發(fā)生變異。為便于向公眾實時更新疫情動態(tài)，世界衛(wèi)生組織(WHO)用希臘字母重新命名了幾種主要的新冠病毒變異毒株，其中包括4種值得關(guān)注的新冠病毒突變株（VOCs）：發(fā)現(xiàn)于英國的新冠病毒突變株（編號B.1.1.7）被命名為Alpha（α）；發(fā)現(xiàn)于南非的新冠病毒突變株（編號B.1.351 ）被命名為Beta（β）；發(fā)現(xiàn)于巴西的新冠病毒突變株（編號為P.1）被命名為Gamma（γ）；發(fā)現(xiàn)于印度的新冠病毒突變株（編號B.1.617.2）被命名為Delta (δ)。其中， Delta新型冠狀病毒變異毒株是目前所有變異毒株中傳染能力最強的，部分數(shù)據(jù)顯示Delta變異毒株的傳染性是Alpha變異毒株的兩倍。

 

除此之外，Lambda（C.37）毒株也不能被忽視，首次發(fā)現(xiàn)Lambda新型冠狀病毒變異毒株是在南美國家，最先發(fā)現(xiàn)于秘魯首都利馬，于2021年6月被世衛(wèi)組織列為“需要留意”的變種病毒之一。 而近期在南非發(fā)現(xiàn)的新型新冠病毒變異株B.1.1.529于11月26日被世界衛(wèi)生組織列為“需要關(guān)注的變異株”，并命名為奧密克戎（Omicron），該突變株擁有32處突變，有可能弱化新冠疫苗的效力，并且更具傳染性。

 

圖1. 冠狀病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)示意圖（來源：網(wǎng)絡(luò)）

 

從上圖可以看出，冠狀病毒基因組依次編碼棘突蛋白（spike protein）、包膜蛋白（envelope protein）、膜蛋白（membrane protein）和核蛋白（nucleoprotein）。

 

針對全球新冠病毒主要突變株及其主要蛋白，賽爾瑞成陸續(xù)開發(fā)生產(chǎn)出一系列新冠蛋白，以便為各領(lǐng)域研發(fā)人員提供應(yīng)對新冠病毒突變的解決方案。

 

核衣殼蛋白（N，Nucleocapsid Protein）
病毒核衣殼內(nèi)最重要的蛋白之一就是核衣殼蛋白（N，Nucleocapsid Protein），主要負責(zé)RNA的復(fù)制功能。核衣殼蛋白（N蛋白）常作為冠狀病毒診斷檢測工具，是免疫學(xué)快速診斷試劑的核心原料。

 

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棘突蛋白（spike protein）
棘突蛋白（spike protein）是冠狀病毒最重要的表面蛋白，與病毒的傳染能力相關(guān)。棘突蛋白含有兩個亞基：S1和S2，其中S1主要包含受體結(jié)合區(qū)域（RBD），負責(zé)識別細胞受體。S2含有膜融合過程所需的基本元件。

 

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二、 化妝品相關(guān)蛋白         

 

重組人III型膠原蛋白
Ⅲ型膠原蛋白，是人體皮膚、筋膜、肌腱中主要的膠原蛋白，與I型膠原蛋白比例為4比1。Ⅲ型膠原蛋白較細小，存在于表皮層和真皮層之間，稱之為“嬰兒膠原蛋白”。微膠原層（Cushion Network）主要由Ⅲ型膠原蛋白構(gòu)成，是指位于表皮層與真皮層之間的組織結(jié)構(gòu)，是撐起表皮的關(guān)鍵，也是肌膚塌陷的第一步。

 

重組人III型膠原蛋白是以人源III型膠原蛋白基因序列為模板，通過基因重組技術(shù)進行發(fā)酵表達，并經(jīng)過多種分離純化方法得到的高純度、分子量均一、低內(nèi)毒素的類人III型膠原蛋白。

 

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精氨酸/賴氨酸多肽
精氨酸/賴氨酸多肽是模擬芋螺毒素勝肽，賽爾瑞成通過基因重組表達出的一種具有類精氨酸/賴氨酸多肽肉毒素效果的多肽成分，具有強效的肌肉松弛作用，但能夠保留肌肉5%神經(jīng)肌肉電流傳導(dǎo)，不至于導(dǎo)致肌肉完全僵硬，以達到自然的抗皺效果。精氨酸/賴氨酸多肽用于祛皺比肉毒素安全，可控度更高。

 

精氨酸/賴氨酸因分子量小，具有較強的透皮效果，與皮膚的相容性佳，不易過敏，具有較好的防老、抗皺效果。

 

賽爾瑞成制備的精氨酸/賴氨酸多肽純度>95%,內(nèi)毒素小于1 EU/μg。

 

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重組人纖連蛋白（Fibronectin，F(xiàn)N）

重組人纖連蛋白（Recombinant human fibronectin， Fibronectin）為一段人工重組蛋白，由574個氨基酸組成，分子量約為63kDa。

 

應(yīng)用：
1. 細胞培養(yǎng)：促進細胞貼壁、細胞黏連生長增殖、維持良好細胞狀態(tài)。
2. 細胞生物學(xué)研究：促進細胞鋪展、遷移、運動；促進細 胞生長、增殖，維持細胞良好細胞狀態(tài)及功能。
3. 美容：修復(fù)受損或老化細胞、促進細胞生長增殖，產(chǎn)生膠原蛋白、彈力蛋白，減少色沉淀，調(diào)動吞噬細胞清除黑色素和細胞碎片。

 

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此外，賽爾瑞成生產(chǎn)的GMP級EGF、aFGF、bFGF、VEGF具有高活性、高純度、低內(nèi)毒素的特點，可應(yīng)用于美容領(lǐng)域，賽爾瑞成可提供克級或千克級蛋白原料供應(yīng)。
 

三、 蛋白A/G/L         

 

蛋白A、蛋白G和蛋白L是科學(xué)家陸續(xù)發(fā)現(xiàn)能夠與抗體進行特異性結(jié)合的蛋白分子。

圖2. 抗體親和層析示意圖

 

目前蛋白A及其衍生的重組蛋白、蛋白G已廣泛應(yīng)用于抗體的純化。隨著我國抗體藥物和免疫診斷產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，抗體制備量將大幅提升，市場對蛋白 G、蛋白 A 的需求量會迅速增加。

 

蛋白A
蛋白A是一種來源于金黃色葡萄球菌的細胞壁表面蛋白，目前，以蛋白A為親和配基的親和層析介質(zhì)已廣泛應(yīng)用于單克隆抗體和Fc重組融合蛋白的純化。

 

由于層析柱在使用時，因樣品中變性的蛋白、脂類、DNA等物質(zhì)常殘留在層析介質(zhì)中，嚴重影響了層析介質(zhì)的使用壽命，常采用0.1-0.5M的氫氧化鈉進行清洗，而天然或普通的重組蛋白A對氫氧化鈉并不耐受，往往導(dǎo)致蛋白A的變性和脫落。

 

賽爾瑞成通過基因重組改造，開發(fā)的耐堿蛋白A擁有四個IgG功能結(jié)合域，末端帶有巰基，具有高耐堿性、高親和力的特點，可作為配基制備成耐堿蛋白A親和層析介質(zhì)。

圖3. 耐堿蛋白A 經(jīng)SDS-PAGE檢測純度>95%

 

表1. 耐堿蛋白A親和層析介質(zhì)耐堿性能測試

 

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蛋白G   
蛋白G是一種源自鏈球菌G族的細胞壁蛋白，分子量25kDa，為三型Fc受體。蛋白G可以與IgG的Fc 區(qū)域特異性結(jié)合，與蛋白A相比對IgG具有更好的結(jié)合能力，血清蛋白結(jié)合水平更低，純度更高，配基脫落也相對更低。天然的蛋白 G不僅與免疫球蛋白的恒定區(qū)相結(jié)合，且與白蛋白、α2-巨球蛋白相結(jié)合，這使得用蛋白G親和色譜提純抗體，無法除去體系中存在的白蛋白和巨球蛋白。

 

賽爾瑞成開發(fā)的重組蛋白G含有三個與Fc結(jié)合的結(jié)構(gòu)域，已經(jīng)除去了與白蛋白及細胞表面結(jié)合位點，減少了交叉反應(yīng)和非特異性結(jié)合。

 

圖4. 蛋白G經(jīng)SDS-PAGE檢測純度>95%

 

表2. 蛋白G偶聯(lián)柱料抗體載量

 

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蛋白L

蛋白L是從馬格努斯消化鏈球菌分離出來的能和免疫球蛋白特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)，分子量36 kD。與蛋白A和蛋白G結(jié)合到（抗體）的Fc區(qū)不同的是，蛋白L能夠結(jié)合那些含有κ輕鏈的抗體，結(jié)合位點位于蛋白L N端的五個小的同源結(jié)構(gòu)域。這些結(jié)構(gòu)域的三維結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)G結(jié)構(gòu)域非常相似，盡管蛋白質(zhì)G和L沒有顯著的序列同源性。

 

蛋白L能夠結(jié)合IgG、IgM、IgA、IgE和IgD，還可以結(jié)合單鏈抗體ScFv和Fab。與蛋白A和蛋白G相比，蛋白L更能廣泛地結(jié)合各種來源及亞類的抗體，包括人、小鼠、大鼠、兔和雞，但不結(jié)合牛、山羊或綿羊來源的免疫球蛋白。

 

賽爾瑞成開發(fā)的重組蛋白L，既保留了與抗體κ鏈結(jié)合的特性，同時也不會影響抗體的抗原結(jié)合位點。

 

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