1、DMSO對(duì)細(xì)胞存在一定的毒性，用量受到限制，降低或者不使用DMSO，尋找其它替代物是最好的選擇。但是目前，該技術(shù)領(lǐng)域還未發(fā)現(xiàn)凍存保護(hù)效果能與DMSO媲美的物質(zhì)，因此，聯(lián)合其它成分，形成新的配方，降低DMSO的含量就成了較為現(xiàn)實(shí)的選擇。
2、血清，即使是純化得到的白蛋白，由于其動(dòng)物來(lái)源的特性，會(huì)極大增加帶來(lái)病毒等感染物質(zhì)的可能。而且，血清來(lái)源受限，價(jià)格昂貴，所以其使用也必然會(huì)受到越來(lái)越多的限制。因此，尋找替代血清的非滲透性保護(hù)劑也顯得尤為必要。
3、目前，最成熟和最穩(wěn)定的凍存細(xì)胞技術(shù)是將加有保護(hù)劑的細(xì)胞懸液置于-196℃液氮中，這樣可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而保持細(xì)胞的特性，在需要的時(shí)候經(jīng)過(guò)復(fù)蘇程序，使得細(xì)胞重新生長(zhǎng)增殖以用于實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞儲(chǔ)存在-196℃液氮中，理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無(wú)限的，但是液氮凍存步驟繁瑣，需要經(jīng)過(guò)程序降溫，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘，然后移至-20℃冰箱30分鐘，再移至-80℃冰箱保存16-18個(gè)小時(shí)（或隔夜），最后才移至液氮罐中進(jìn)行長(zhǎng)期的儲(chǔ)存。（其中需要注意的是-20℃條件下不可超過(guò)1個(gè)小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量的死亡。）
1. 高安全性，不含血清及動(dòng)物源成分，病毒、霉菌和支原體等污染可能性低，各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。
2. 低DMSO，DMSO的含量為5%（v/v），極大降低了對(duì)細(xì)胞潛在的毒性作用。
3. 細(xì)胞存活率高，無(wú)批次差異。
4. 完全凍存液配方，可直接使用，方便簡(jiǎn)捷。
5. 可直接存放于-80℃冰箱凍存，無(wú)需經(jīng)過(guò)費(fèi)時(shí)的程序降溫過(guò)程（省時(shí)、省力、省錢(qián)），不需要采用程序降溫儀，更不需要放置在-196℃液氮。
6. 可原位凍存，比如雜交瘤細(xì)胞的亞克隆，可以大規(guī)模減少工作量，避免污染。
凍存效果對(duì)比：
圖1. 小鼠成纖維細(xì)胞3T3細(xì)胞復(fù)蘇后細(xì)胞狀態(tài)對(duì)比圖
對(duì)照B：存活率89% 本產(chǎn)品：存活率97%
圖2. 人胚腎細(xì)胞293E細(xì)胞復(fù)蘇后細(xì)胞狀態(tài)對(duì)比圖
對(duì)照B：存活率86% 本產(chǎn)品：存活率93%
注：對(duì)照A: DMEM培養(yǎng)基+10%血清+10%DMSO，液氮凍存；
對(duì)照B: Cellregen無(wú)血清細(xì)胞凍存液（DMSO 10% v/v）；
本 品：無(wú)血清低DMSO細(xì)胞凍存液（DMSO 5% v/v）。
附： 通用細(xì)胞凍存液，Cellregen無(wú)血清細(xì)胞凍存液、無(wú)血清低DMSO細(xì)胞凍存液的比較
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通用細(xì)胞凍存液 |
Cellregen 無(wú)血清細(xì)胞凍存液 |
無(wú)血清低 DMSO 細(xì)胞凍存液 |
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主要成份 |
含血清、含 DMSO |
不含血清，含 DMSO 10% |
不含血清，低 DMSO 5% |
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細(xì)胞毒性 |
高 |
高 |
低 |
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安全性 |
低 動(dòng)物來(lái)源病毒、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險(xiǎn)偏高 |
高 無(wú)動(dòng)物來(lái)源病毒、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險(xiǎn) |
高 無(wú)動(dòng)物來(lái)源病毒、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險(xiǎn) |
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凍存細(xì)胞種類 |
適合含血清細(xì)胞凍存 |
通用型 適合各類細(xì)胞凍存 |
通用型 適合各類細(xì)胞凍存 |
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無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài) |
易改變易由懸浮狀態(tài)回復(fù)貼壁狀態(tài) |
保持懸浮培養(yǎng)狀態(tài) |
保持懸浮培養(yǎng)狀態(tài) |
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批次差異 |
批次差異大 |
無(wú)批次差異 |
無(wú)批次差異 |
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操作方法 |
步驟繁瑣 需程序降溫凍存 |
簡(jiǎn)單快捷 一步凍存 -80 ℃冰箱 |
簡(jiǎn)單快捷 一步凍存 -80 ℃冰箱 |
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保存設(shè)備 |
要求高（液氮） |
要求低（ -80℃ 冰箱） |
要求低（ -80℃ 冰箱） |
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微量?jī)龃?/span> |
細(xì)胞易死亡，存活率偏低 |
細(xì)胞存活率高 |
細(xì)胞存活率高 |
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原位凍存 |
不可行 |
可行，且方便快捷 如 : 雜交瘤細(xì)胞孔板凍存 |
可行，且方便快捷 如 : 雜交瘤細(xì)胞孔板凍存 |
