賽爾瑞成技術(shù)團(tuán)隊(duì)持續(xù)在細(xì)胞凍存領(lǐng)域進(jìn)行研究工作,目前已開發(fā)出6款無血清細(xì)胞凍存液,均是通用型細(xì)胞凍存液,適用于凍存大部分動物及人的細(xì)胞系和原代細(xì)胞。賽爾瑞成自2018年推出第一款經(jīng)典的無血清細(xì)胞凍存液以來,CRD系列無血清細(xì)胞凍存液因其過硬且穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量,獲得了國內(nèi)數(shù)百家實(shí)驗(yàn)室和企業(yè)用戶的認(rèn)可,廣泛服務(wù)于國內(nèi)細(xì)胞生物學(xué)研究和應(yīng)用。
賽爾瑞成無血清細(xì)胞凍存液系列產(chǎn)品發(fā)展史
◆ 2018年9月,賽爾瑞成第一款無血清細(xì)胞凍存液上市,命名Cellregen無血清細(xì)胞凍存液,此款產(chǎn)品為賽爾瑞成無血清細(xì)胞凍存液經(jīng)典款,不含血清,DMSO含量為10%;
◆ 2020年5月,賽爾瑞成無血清低DMSO細(xì)胞凍存液上市,不含血清,DMSO含量為5%。并于2022年9月,獲得專利授權(quán)(一種無血清低 DMSO 細(xì)胞凍存液及其應(yīng)用,專利號: ZL 2020 1 0307890.6)。
◆ 2021年8月,賽爾瑞成無血清無DMSO細(xì)胞凍存液上市,不含血清,不含DMSO,同時對三款無血清凍存液進(jìn)行更名:
◆ 2023年3月,賽爾瑞成CRD10-A無血清細(xì)胞凍存液上市,不含血清,DMSO含量為10%;
◆ 2023年4月,賽爾瑞成重磅推出CRD000化學(xué)限定細(xì)胞凍存液 (無血清無DMSO無蛋白),不含血清,無DMSO,無蛋白;
◆ 2023年8月,賽爾瑞成CRD10Pro無血清細(xì)胞凍存液上市,不含血清, DMSO含量為10%,無蛋白。
共同特色
★ 不含血清、減少病毒、霉菌和支原體等的污染;
★ 成分明確,主要成分符合藥典標(biāo)準(zhǔn),無批次間差異;
★ 特別配方,有效提高細(xì)胞凍存存活率及復(fù)蘇率;
★ 即用型,無需現(xiàn)配,即開即用;
★ 無需程序降溫,可-80℃冰箱/液氮保存;
★ 可原位凍存,比如雜交瘤細(xì)胞的亞克隆,可以減少工作量。
如何區(qū)分
賽爾瑞成無血清細(xì)胞凍存液系列產(chǎn)品使用方法
凍存管凍存及復(fù)蘇方式
凍存方式:
選擇凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。
1、按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。
2、按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計算所需凍存細(xì)胞數(shù)。(參考:5×105至5×106 cells/ml)。
3、取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min)。移去離心管中的上清液。
4、加入適量無血清細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度為5×105至5×106 cells/ml。緩慢混合均勻,制成細(xì)胞混合液。
5、將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示的冷凍保存管中。
6、直接將含細(xì)胞懸液的凍存管放入-80℃冰箱,冷凍保存。
7、若研究者需要液氮保存時,可先放入-80℃冰箱過夜后,再移至-196℃液氮罐。
復(fù)蘇方式:
1、從冰箱取出凍存細(xì)胞管,立即放入37℃水浴槽中快速解凍。
2、待凍存的細(xì)胞懸液完全融化后,立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9 ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。
3、離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min),移去上清液。
4、清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液。
5、加入適量新鮮培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。
6、鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
原位凍存及復(fù)蘇方式
凍存方式:
選擇凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。
1、從培養(yǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清吸取干凈。
2、加入適量無血清細(xì)胞凍存液于培養(yǎng)孔板中,充分浸潤細(xì)胞。
3、蓋上蓋板,做好密封措施,防止染菌。
4、直接將含凍存液的細(xì)胞培養(yǎng)板放入-80℃冰箱,冷凍保存。
復(fù)蘇方式:
1、從冰箱取出凍存培養(yǎng)板,立即放入37℃水浴槽中快速解凍。
2、待凍存的細(xì)胞懸液完全融化后,輕輕吸去細(xì)胞凍存液,按照常規(guī)換液操作加入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。